茶 茶多酚测定
在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物,均称茶多酚。
1、原理
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。
2、仪器和用具
实验室常规仪器及下列各项:
2.1 分析天平: 感量0.0001g。
2.2 分光光度仪。
3、试剂和溶液
所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。
3.1 酒石酸亚铁溶液: 称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁(GB 664-77)和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠(GB 1288-81),用水溶解并定容至1L(溶液应避光,低温保存,有效期一个月)。
3.2 pH7.5磷酸盐缓冲液:
3.2.1 1/15M磷酸氢钠: 称取23.377g磷酸氢二钠(GB 1263-77),加水溶解后定容至1L。
3.2.2 1/15M磷酸二氢钾: 称取9.078g磷酸二氢钾(GB 1274-77),加水溶解后定容至1L。
取上述1/15M的磷酸氢二钾溶液85ml和1/15m的磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。
4、操作方法
4.1 取样
按GB 8302-87《茶 取样》的规定取样。
4.2 试样的制备
按GB 8303-87《茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定,制备试样。
4.3 测定步骤
4.3.1 试液的制备
按GB 8305-87《茶 水浸出物测定》中3.4.1的规定,制备试液。
4.3.2 测定
准确吸取上述(4.3.1)试液1mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亚铁溶液(3.1)5mL,充分混合,再加pH7.5的缓冲液(3.2)至刻度,用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
5、结果计算
5.1 计算方法和公式
A×1.957×2 L1
茶多酚(%)=──────×─────×100
100 L2×M×m
式中: L1——试液的总量,mL;
L2——测定时的用液量,mL;
M——试样的质量,g;
m——试样干物质含量百分率,%;
A——试样的吸光度;
1.957——用10mm比色杯,当吸光度等于0.50时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
如果符合重复性(5.2)的要求,则取两次测定的算术平均值作为结果。
5.2 重复性
同一样品的两次测定值之差,每100g试样不得超过0.5g。
6、结果报告
试验报告应包括下列内容:
a. 使用的方法;
b. 测定的结果(取小数点后一位);
c. 本标准中未规定的或另加的操作;
d. 试样的名称和产地;
e. 试验日期,操作人员。